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大鼠C肽(C-P)ELISA说明书
大鼠C肽(C-P)ELISA说明书
更新时间: 2026-02-28
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厂商性质: 生产厂家

大鼠C肽(C-P)ELISA--打折销售中,咨询!

大鼠C肽(C-P)ELISA说明书产品概述:

大鼠C肽(C-PELISA说明书

本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中C肽(C-P)含量。

标本处理及要求

1.血清、血浆标本可直接测定;

2.尿液、脑脊液、腹腔液:2000-3000/分离心10分钟后,取上清液待测。

3.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

4.采集后尽早进行实验,若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。

试剂盒组成

1

20倍浓缩洗涤液

30ml×1

7

终止液

6ml×1

2

酶标试剂

6ml×1

8

标准品(270ng/L

0.5ml×1

3

酶标包被板

12孔×8

9

标准品稀释液

1.5ml×1

4

样品稀释液

6ml×1

10

说明书

1

5

显色剂A

6ml×1

11

封板膜

2

6

显色剂B

6ml×1/

12

密封袋

1

自备物品

137℃ 恒温箱

2、 标准规格酶标仪

3、 精密移液器及一次性吸头

4、 蒸馏水

5、 一次性试管

6、 吸水纸

操作步骤

1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在*、第二孔中分别加标

准品100μl,然后在*、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从*孔、第二

孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl

混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔

中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各

50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混

匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准

品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl

浓度分别为180ng/L120ng/L60ng/L30ng/L15ng/L)。

2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样

品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样

品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混

匀。

3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用

5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此

重复5次,拍干。

6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7.温育:操作同3

8.洗涤:操作同5

9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色

15分钟.

10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止

液后15分钟以内进行。

计算

以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的

OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标

准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,

即为样品的实际浓度。

注意事项

1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

4.请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔*孔OD值的),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请zui后乘以总稀释倍数(×n×5)。

5.严格按说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

6.本试剂不同批号组分不得混用。

7.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9.底物请避光保存。

检测范围:

7.5ng/L -250ng/L

保存条件及有效期

1.试剂盒保存:;2-8℃。

2.有效期:6个月

大鼠4-羟基壬烯酸(4-HNE)elisa检测试剂盒

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