| 更新时间： | 2026-03-10 |
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| 厂商性质： | 生产厂家 |
本品用于分离猴胰岛细胞
Store at: RT° C Size :2X100ml/kit试剂盒内容
试剂：全血及组织稀释液 100ml
试剂：细胞洗涤液 100ml
试剂B： 100ml
试剂D： 100ml
说明书 1份
操作说明细胞分离液试剂盒操作说明：：：：
Store at：：：RT试剂盒规格：：：：2×100ml/Kit
猴胰岛细胞分离液试剂盒：
货号品牌产品名称规格报价
| 干细胞分离液 | ||||
| LGS1073 | TBD | 人骨髓间充质干细胞分离液 | 200ml | 400 |
| LGS1068 | TBD | 人外周血造血干细胞分离液 | 200ml | 400 |
| LGS1072 | TBD | 大鼠骨髓间充质干细胞分离液 | 200ml | 400 |
| LGS1072W | TBD | 大鼠外周血造血干细胞分离液 | 200ml | 400 |
| LGS1081 | TBD | 小鼠骨髓间充质干细胞分离液 | 200ml | 400 |
| LGS1081W | TBD | 小鼠外周血造血干细胞分离液 | 200ml | 400 |
| LGS1090 | TBD | 兔骨髓间充质干细胞分离液 | 200ml | 400 |
| LGS1090W | TBD | 兔外周血造血干细胞分离液 | 200ml | 400 |
| LGS1072Z | TBD | 狗骨髓间充质干细胞分离液 | 200ml | 400 |
| LGS1072GW | TBD | 狗外周血造血干细胞分离液 | 200ml | 400 |
| LGS1082 | TBD | 牛骨髓间充质干细胞分离液 | 200ml | 400 |
| LGS1082W | TBD | 牛外周血造血干细胞分离液 | 200ml | 400 |
| LGS1080 | TBD | 豚鼠骨髓间充质干细胞分离液 | 200ml | 400 |
| LGS1080W | TBD | 豚鼠外周血造血干细胞分离液 | 200ml | 400 |
| LGS1086C | TBD | 鸡骨髓间充质干细胞分离液 | 100ml | 400 |
| LGS1086CW | TBD | 鸡外周血造血干细胞分离液 | 100ml | 400 |
| LGS1074 | TBD | 猴骨髓间充质干细胞分离液 | 200ml | 400 |
| LGS1074W | TBD | 猴外周血造血干细胞分离液 | 200ml | 400 |
| LGS1106 | TBD | 猪骨髓间充质干细胞分离液 | 100ml | 400 |
全血及组织稀释液100ml
细胞洗涤液100ml
试剂B 100ml
试剂D 100ml
说明书1份
一、、、、分离方法说明及图例
A.在10ml或15ml玻璃离心管中依次小心加入B、D两种液体各2ml,制成梯度界面（各液面分层一定要清晰）；
B．取1ml新鲜抗凝血与全血及组织稀释液（Cat#：2010C1119）1：1混合并小心加于D液之液面上；或取组织匀浆单细胞悬液（细胞浓度为2×108-1×109个/ml，具体制备方法参照
“二、组织单细胞悬液的制备”）小心加于D液之液面上；
C.以400g（约1500转/分）离心15分钟(半径15cm水平转子)；
此时离心管中由上至下细胞分为五层。*层；为血浆层或组织匀浆液层。第二层；为
富含胰岛细胞的D液层。。。。第三层；为单个核细胞层。第四层；为透明B液层。第五层；为红细胞层。收集第二层富含胰岛细胞的富含胰岛细胞的富含胰岛细胞的D液层放入含4-5ml细胞洗涤液（Cat#：2010X1118）的试管中，充分混匀后，以500g（约1800转/分）离心20分钟，弃去上清留沉淀细胞重新悬起。重复洗涤2次即得所需胰岛细胞。
注：：：：A.提取率约为80%。
注：：：：A.. ..本说明只提供机械匀浆制备单细胞悬液的方法本说明只提供机械匀浆制备单细胞悬液的方法本说明只提供机械匀浆制备单细胞悬液的方法，，，，酶消化法由于各实验室选取的消化酶消化法由于各实验室选取的消化酶种类各不相同，酶种类各不相同，，，请各实验室自行选择进行试验请各实验室自行选择进行试验请各实验室自行选择进行试验。。。。全过程及所需试剂要求无菌环境全过程及所需试剂要求无菌环境全过程及所需试剂要求无菌环境。。。。剪碎法：：：：将组织块放入平皿后，加入少量组织匀浆液及20%胎牛血清；用眼科剪将组织剪至匀浆状，加入5ml组织匀浆液及20%胎牛血清；用吸管吸取组织匀浆，用100目不锈钢滤网
(另购)过滤到试管内；离心沉淀1500转/分×3 min，再用细胞洗涤液清洗3次，每次以500rpm短时低速离心除去细胞碎片，以200目不锈钢滤网（另购）过滤去细胞团块。作细胞计数并调整细胞浓度为（2～5）×107个/ml。常温下放置,待测细胞的活力。分离前用20%胎牛血清或全血及组织稀释液悬起细胞浓度为2×108-1×109个/ml的单细胞悬液备用。
匀浆器法：用眼科剪将组织剪成小块；放入70ml组织研磨器内，加入2ml组织匀浆液及20%匀浆器法胎牛血清；缓慢转动研棒，研磨至匀浆；用5ml组织匀浆液及20%胎牛血清冲洗研器；收集细胞悬液，经200目不锈钢滤网（另购）过滤；离心沉淀800rpm×2min，再用细胞洗涤液洗3次，离心沉淀。作细胞计数并调整细胞浓度为（2～5）×107个/ml。常温下放置,待测细胞的活力。分离前用20%胎牛血清或全血及组织稀释液悬起细胞浓度为2×108-1×109个/ml的单细胞悬液备用。细胞计数方法:细胞计数法是用来计数细胞悬液中细胞数量的一种方法。一般利用计数板（血球计数板）进行。既可用于分离（散）细胞培养接种前计数所制备的细胞悬液中的细胞数量，也可用于
对培养物的细胞数量进行计数。不论计数的对象如何，均须制备分散的细胞悬液。
1）、在细胞计数板中央放置计数的盖玻片。
2）、用玻璃虹吸管吸取细胞，让虹吸管在盖玻片上或下侧的计数板凹蹧处流出悬液，至
盖玻片被液体充满为止。
3）、置显微镜下计数四角大方格内的细胞总数。对于压线的细胞只计数在上线和左线者，
对于细胞团按单个细胞计数。
4）、按下式计数细胞悬液的密度：
细胞密度＝（4个大格细胞总数/4）×104个/ml×稀释倍数
公式中乘以104因为计数板中每一个大格的体积为：
1.0mm（长）×1.0mm（宽）×0.1mm（高）＝0.1mm3
而1ml＝1000mm3
细胞计数要点：：：：
A．进行细胞计数时，要求悬液中细胞数目不低于104个/ml，如果细胞数目很少要进行离
心再悬浮于少量培养液中；显微镜下计数时，遇到2个以上细胞组成的细胞团，应按单个细胞计算。如果细胞团>10％，说明细胞分散不充分;或细胞数<200个/10mm2或>500个/10 mm2时，说明稀释不当，需重新制备细胞悬液。
B．要求细胞悬液中的细胞分散良好，否则影响计数准确性。
C．取样前充分混匀细胞悬液，尤其多次取样更要注意每次取样都要混匀，以求计数准确；
D．数细胞的原则是只数完整的细胞，若细胞聚集成团时，只按照一个细胞计算。如果细
胞压在格线上时，则只计上线，不计下线，只计左线，不计右线。
E．操作时，注意盖玻片下不能有气泡，也不能让悬液流入旁边槽中，否则要重新计数。
初学者易犯的错误：初学者易犯的错误：：：
A．计数前未将待测悬液吹打均匀。
B．滴入细胞悬液时盖玻片下出现气泡。
C．滴入悬液时的量太多，至使细胞悬液流入旁边的槽中。
三、、、、注意事项
A．本分离液是敏光型的，运输和贮藏过程中在18℃-25℃避光保存，启封后4℃保存本品只能用于科学研究，不能用于临床检测
避免微生物污染。本品为真空包装，未启封前于10℃以下易出现白色结晶，影响分离效果。
B．待分离的血液及组织样本要求新鲜，避免冷冻和冷藏。分离液和所分离样本一定在
20℃水浴箱中复温20分钟保证分离液和所分离样本温度在20℃±2℃时分离效果，且
所有操作过程一定要在无菌条件下进行。
C．由于各品牌离心机的性能不同，国内南北地区温度环境和四季差异，可能影响分离
效果，用户可调节离心转数及离心时间，摸索*的分离条件（具体分离条件各实验室自定）。
D．使用无静电反应的离心管，推荐使用未经过碱处理的玻璃离心管。
E．*抗凝剂选择：EDTA、枸橼酸、肝素。注意在血液稀释过程中应去除抗凝剂体积。
F．分离过程中所用其他试剂如：羟乙一基淀粉550、全血及组织稀释液、细胞洗涤液及
红细胞裂解液等以我公司产品为*选择，本公司相关系列产品无菌、无病毒、无支原体、
低内毒素水平且无细胞毒性，所获得的细胞可保持完好的生物活性和完整的细胞形态。
四、、、、产品性能指标
pH 7.0-7.5
渗透压280-340mOsmol/kg
内毒素≤0.5...EU/ml
无菌直接接种培养14天后培养基澄清
澄明度及不溶性颗粒物每50ml溶液中含10μm以上的不溶性微粒以上的不溶性微粒以上的不溶性微粒20粒以下含25μm以上的不溶性微粒以上的不溶性微粒以上的不溶性微粒5粒以下
五、、、、贮藏及保存期限贮藏及保存期限贮藏及保存期限
18℃-25℃避光保存，有效期两年。启封后置4℃保存，有效期一周。
注：：：：若保证无微生物污染，启封后可置4℃长期保存。但应注意保存温度较低时本分离液易出现白色结晶，影响分离效果。
